缓冲溶液是一类能够抵制外界少量强酸和强碱的影响,维持体系pH值基本不变的溶液,其在生物化学的研究工作中有着极为重要的意义。羟甲基氨基甲烷是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂。我们先从它的pH值说起。
三羟甲基氨基甲烷Tris-Base白色粉末状
Tris缓冲液pH范围
Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,它的常用有效pH范围是在“中性”范围,如:
Tris-HCL缓冲液:pH=7.5~8.5
Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0
除TRIS-HCL外,TRIS还有多种衍生化缓冲:
TBS=Tris-HCL+NaCl+KCl常用来清洗免疫染色组织或Western blotting中的Western blotting膜;
TBST=Tris-HCL+NaCl+tween20,一种常用于Western Blotting的膜缓冲液;
TE=Tris-HCL+EDTA,对DNA碱基具有保护作用,常用于DNA的稳定和储存;
TAE=Tris碱+乙酸+EDTA,是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系;
TBE=三碱基+硼酸+EDTA,适用于长期DNA电泳,对小片段有较好的分离效果。
Tris缓冲液的优点
1.因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;
2.对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
Tris缓冲液的缺点
1.缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;
2.温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃;
3.易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封;
4.此缓冲液对某些pH电极发生一定干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
由此可以看出在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。倍斯特生物科技经过多年的自主研发生产,在中国本土市场已得到客户的广泛认可和使用。多年来国内众多知名生产企业一直选择和使用我们的产品。我们也可根据客户需求定制不同pH值的缓冲液。
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