TCEP是一种非常有效的硫醇类还原剂,广泛用作蛋白质化学及蛋白质组学研究中二硫键的定量还原剂。该试剂在水溶液中的稳定性和溶解性都很好。在酸性、碱性溶液中的稳定性也不错。与其他类别的硫醇类还原剂如DTT相比,TCEP不仅是一种高效的二硫键还原剂,而且在某些巯基的交联反应中不需要除掉。因而在蛋白质化学及蛋白质组学研究常常优先选择TCEP。
三(2-羧乙基)膦盐酸(TCEP-HCL)是一种非挥发性的固体。它是一种强还原剂。可通过回流HCL水溶液水解三(2-氰基乙基)膦酸合成。它支持多种生物学应用,如体外和体内还原各种肽和蛋白质中的二硫键。TCEP是适于各种重金属离子的重要螯合剂,如Zn(II)、Cd(II)、Pb(II)和Ni(II)。
众所周知,三烷基膦类化合物具有还原二硫键的性质。这类化合物在水溶液中稳定性好,可以选择性还原二硫键,并且基本不和蛋白质中常规的其他活性官能团反应。但是由于这类水溶性较差,气味难闻,因而在应用中受到限制。但是TCEP的出现解决了这些问题。
TCEP在很宽的pH值范围内都可以选择性定量地还原哪怕水溶性很差的烷基类二硫化合物。通常室温下反应不到5分钟就可以完成。TCEP没有难闻的气味,而且在空气中不怕氧化。
三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP hydrochloride,TCEP-HCL)是一种不含硫醇基且无臭的化合物,广泛应用于生物化学和分子生物学中,用作多肽或蛋白质的二硫键还原剂。与其他类似的还原剂如二硫苏糖醇(DTT),β-巯基乙醇(β-ME)相比,TCEP-HCL具有多种优点:1)无异味——实验台上使用即可,勿需通风橱;2)稳定性高——化合物本身结构的稳定性使得在操作、使用以及保存的过程中不需要做任何预防措施来避免氧化发生。不会挥发,室温反应即可。室温稳定,抗空气氧化。水溶性缓冲液,酸液以及碱液中稳定。不会与蛋白中的其他功能基反应;3)pH工作范围广——几乎溶于任何pH值的水溶性缓冲液,pH有效工作范围为1.5-9.0。直接溶于水后的pH值约为2.5;4)还原性强——对于大部分实验,5-50mM TCEP-HCL即可提供足够的摩尔力,于室温条件作用几分钟来充分还原二硫键;5)兼容性广——不含有硫醇基,进行下游的巯基修饰实验如马来酰亚胺偶联不需要提前去除此还原剂。
Thermo Scientific Pierce优级TCEP-HCL是我们为这种二硫键还原剂提供的最高质量配方,专门针对产品完整性和风险缓解至关重要的应用进行了特殊表征。
与标准级产品相比,优级TCEP-HCL涵盖(a)更多的分析检测和产品表征,(b)更高的批次特异性信息和质量保证审查,(c)大量批次样品留存和,(d)变更控制通知,从而提供有更清晰明确的质量和产品支持。TCEP-HCL是一种高纯度、结晶状三(2-羰基乙基)磷盐酸盐,是一种不含硫醇、可以有效地还原蛋白和多肽二硫键,同时又无味且稳定的化合物。TCEP可在较宽的pH范围内选择性地彻底还原较稳定的水溶性烷基化二硫。