溴化乙锭(Ethidium Bromide CAS:1239-45-8溴化乙啶(简称EB)是目前在紫外线下观察DNA而常用的一种荧光染料,属于插入染料,原因是它有多环结构,这种结构使它能够插入核苷酸碱基之间。由于核酸和碱基的荧光量子产率很低,因此利用天然荧光检测核酸比蛋白质困难更大,所以荧光探针技术在核酸研究中显得尤为重要。比较常用的是溴化乙啶(et-hid...

溴化乙锭(Ethidium Bromide)CAS:1239-45-8

溴化乙锭(Ethidium Bromide)CAS:1239-45-8

溴化乙锭
溴化乙腚;溴化乙啶/溴化乙锭;溴化-3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶翁;溴化乙啶;溴化乙锭;溴化乙啶/溴乙菲啶;溴化乙啶(EB);溴化乙锭,98%(DRY WT.)
Ethidium bromide
3,8-diaMino-5-ethyl-6-phenylphenanthridin-5-iuMbroMide;EthidiuMbroMidedropperbottle,5Ml;
2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenylphenanthridiniumbromide,1%aqueoussolution;
Ethidiniumbromide,3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridiniumbromide;
EthidiuMBroMide,OMniPur(R);EthidiuMbroMide,pure,95%1GR;EthidiuMbroMide,pure,95%5GR;Dromilac
1239-45-8
214-984-6
C21H20BrN3
C21H20BrN3
394.32
工业级
1.3739(rough estimate)
95%
260-262°C(dec.)(lit.)
>100°C
1.6700(estimate)
40g/L(25 ºC)
H2O: 10 mg/ml,opaque,strongly red.
深红色结晶粉末。
T,T+
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性。
实际上到2013年6月6日前还不能证明溴化乙锭是基因致癌物。还没有任何证据能证明直接接触EB(溴化乙锭)能对任何动物有毒害性。人们认为EB有致癌性仅仅是因为试管培养细胞时,EB能够抑制细胞生长。
虽然溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。但是溴化乙锭并不能通过皮肤进入细胞内。所以说溴化乙锭相对其他的致癌物质还是比较安全的。
23-68-36/37/38-26-21/22-22
UN 2811 6.1/PG 1
36/37-45-36/37/39-28A-26-22-28-63
吸入有毒;可能有不可逆后果的危险;刺激眼睛、呼吸系统和皮肤;吸入有极高毒性;皮肤接触及吞食有害。
29339990
密封、在2 ºC -8 ºC下保存
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统拍摄。对于在电泳后进行凝胶染色,应先用水将储存液样品Chemicalbook稀释到0.5μg/ml,再将凝胶孵育15-30分钟。通常无需脱色,但是如果必须降低背景色,则可在水中脱色15分钟。然后可在紫外灯箱(254nm波长)中检测DNA条带。也可将溴化乙啶加到凝胶和电泳缓冲液(终浓度0.5μg/ml)中,并在电泳后立即显影。
观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团,它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的DNA条带。
由于在该染料存在的情况下,线状DNA的电泳迁移率约降低15%,因此,当需要知道DNA片段的准确大小(如DNA限制酶酶切图谱的鉴定)时,凝胶应该在无EB情况下电泳,电泳结束后用EB染色。染色完毕后,通常不需要脱色。但是在检测小量DNA(小于10ng)片段时,通常要将染色后的凝胶进行脱色。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸(DNA或RNA)。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小,所以其荧光产率也相对较低。事实上,大多数对单链DNA或RNA染色的荧光是通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。
1.穿戴适当的防护服、手套和护目镜或面具。
2.不慎与眼睛接触后,请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。
3.切勿吸入粉尘。
4.不慎与皮肤接触后,立即用大量肥皂水冲洗。

溴化乙啶(简称EB)是目前在紫外线下观察DNA而常用的一种荧光染料,属于插入染料,原因是它有多环结构,这种结构使它能够插入核苷酸碱基之间。由于核酸和碱基的荧光量子产率很低,因此利用天然荧光检测核酸比蛋白质困难更大,所以荧光探针技术在核酸研究中显得尤为重要。比较常用的是溴化乙啶(et-hidiumbromide或称菲啶溴红),它与核酸(DNA、RNA、双链多聚核苷酸)有特异结合的能力。它对脱氧核糖核酸的最低检测量可达10ng/ml,而且它与核酸的双链区结合是专一的,利用它与各种构象核酸结合比例的不同所产生的荧光强度的变化,可以把各种构型核酸加以区分。例如它能鉴别天然核酸和变性核酸,区分线性DNA、环状DNA和超级线团DNA等。此外各种吖啶,包括吖啶橙、吖啶黄以及前黄素等都是核酸常用的探剂。

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